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臍帶是哺乳類(lèi)的連接胎兒和胎盤(pán)的管狀結(jié)構(gòu),由兩條動(dòng)脈和一條靜脈構(gòu)成。臍帶呈圓柱狀結(jié)構(gòu),內(nèi)有兩條臍動(dòng)脈及一條臍靜脈。臍帶內(nèi)有一條臍靜脈,接受從母體來(lái)的新鮮血液并流經(jīng)胎兒全身回到胎兒的動(dòng)脈系統(tǒng),最后進(jìn)入兩條臍動(dòng)脈流入胎盤(pán)至母體,這是胎兒血循環(huán)的特點(diǎn)之一。胎兒藉以生存的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如電解質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽、激素、微量元素、免疫抗體等,均需經(jīng)過(guò)臍帶傳送。
臍帶也一直是科研人員競(jìng)相研究的一塊領(lǐng)域,例如臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,它聯(lián)合造血干細(xì)胞移植可發(fā)揮強(qiáng)大的造血支持能力??茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細(xì)胞具有調(diào)節(jié)免疫的作用,有著廣泛的臨床應(yīng)用前景。它可以改善骨髓造血微環(huán)境,促進(jìn)造血干細(xì)胞的植入,顯著加快移植后的造血重建,安全且并發(fā)癥少。同時(shí),適量的間充質(zhì)干細(xì)胞在造血干細(xì)胞移植中,可以降低移植物抗宿主病的發(fā)生率和嚴(yán)重程度。
山東銀豐生物集團(tuán)就利用上海凈信浸入式液氮冷凍研磨儀研磨臍帶,提取RNA。凈信便攜式液氮冷凍研磨儀功能強(qiáng)大,是世界上技術(shù)領(lǐng)先的液氮冷凍研磨設(shè)備,全過(guò)程超低溫運(yùn)行,是市場(chǎng)上公認(rèn)的高效的研磨設(shè)備:其冷凍研磨方法是一種先進(jìn)的、高效的、方便的樣品處理方法,可以處理常規(guī)方法難以處理的樣品,如:塑料、橡膠、樹(shù)脂、皮革、毛發(fā)、骨骼、木材、紡織原料等等,被稱為研磨的終極手段。液氮冷凍研磨儀應(yīng)用領(lǐng)域廣泛,如生物化學(xué)中的RNA/DNA檢測(cè)、聚合物結(jié)構(gòu)分析、痕跡元素的判斷、食品分析、礦物質(zhì)研究、醫(yī)療外科手術(shù)的輔助、藥品性能的檢測(cè)、紡織品組成成分的鑒定等等。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>通過(guò)研磨臍帶組織,提取RNA
實(shí)驗(yàn)材料和器具:
樣品:臍帶組織
工具:凈信全自動(dòng)樣品快速研磨儀
耗材:專(zhuān)用研磨罐,液氮、剪刀、鑷子等
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、準(zhǔn)備研磨罐和樣品;
2、取組織剪成小塊放入研磨罐中,將蓋子蓋緊;
3、將研磨罐置于裝有液氮的容器內(nèi),液氮容量沒(méi)過(guò)研磨罐冷凍幾分鐘,取出時(shí)戴手套或使用鑷子夾取避免液氮凍傷;
4、首先將適配器放入研磨儀中固定,然后在將研磨罐放置適合器內(nèi),以保證研磨時(shí)的受力平衡,旋緊垂直定位螺旋,將安全鎖扣緊。
5、設(shè)置參數(shù)啟動(dòng)程序結(jié)束后即可得到破碎粉末;
6、研磨完畢后請(qǐng)關(guān)閉電源,將安全鎖歸位;
7、完成后續(xù)RNA提取步驟。
實(shí)驗(yàn)解決的問(wèn)題:
1、儀器研磨相對(duì)手工研磨速度更快,縮短整體實(shí)驗(yàn)時(shí)間;
2、儀器研磨出料顆粒均勻、細(xì)膩,無(wú)需過(guò)篩,可直接進(jìn)行下一步提取工作;
3、避免樣品污染與浪費(fèi)
實(shí)驗(yàn)過(guò)程、結(jié)果圖示:
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